|
Смирнов А.Е. Макро, микро и супермикро...или зачем металловеду электронный микроскоп |
|||
|
Как металловеды используют металлографический микроскоп, вы уже знаете. Об этом было здесь.
А как приспособить электронный микроскоп для решения своих задач? Итак, вооружаемся объектами для исследований, десятком банок пива и едем в гости в одну замечательную организацию, которую просили нигде не называть... 
Начнём с того, что у нас была возможность выбора, на каком микроскопе семейства VEGA проводить исследования. Мы выбрали микроскоп VEGA II XMU с разрешающей способностью 3 нм (0,003 микрометра!) и возможностью исследований в низком вакууме, что актуально для биологических объектов, которые, в отличие от металлов, имеют большее электросопротивление и способны заряжаться от электронного пучка. Какой необходимый шаг перед откупоркой банок с пивом...? Правильно! Пиво нужно охладить, а биологические объекты, к коим относятся споры (не электропроводные, заметим) нужно металлизировать, чтобы избежать заряда объекта и последующих негативных явлений, таких как появление белых размазанных «хвостов» на изображении, или, что значительно хуже, сдувания лёгкого объекта электронным «ветром». Итак, холодное пиво, металлизированные объекты и электронный микроскоп… Небольшое отступление. Электронно-микроскопические изображения сопровождены фотографиями спор, выполненными на обычном металлографическом микроскопе при увеличении 500 крат, и, конечно же, фотографиями самого Его Величества Гриба. В том числе и стерео. Подосиновик красный (Leccinum aurantiacum)
Для начала - банальный гриб – хорошо известный всем Подосиновик красный (Leccinum aurantiacum) с гладкими спорами. 
Действительно, в случае гладкой поверхности спор электронная микроскопия не даёт существенных преимуществ. Сравните сами оптическую фотографию (слева) и электронно-микроскопическое изображение (справа). Новых деталей мы не видим, потому что их нет: выигрыш только в глубине резкости. Дисцина щитовидная (Discina perlata)
Слева - стереофотография, справа - одиночная фотография для тех, кто до сих пор не научился рассматривать стереофото 
Шероховатая поверхность споры – и электронная микроскопия даёт возможность увидеть мельчайшие детали строения поверхности. Однако мы с Вами тут же замечаем существенный недостаток электронной микроскопии – она не даёт возможности заглянуть внутрь объекта и изучить его строение. 
Сравните сами: если оптическая микроскопия сухих спор (фото слева) даёт возможность увидеть шероховатую поверхность споры, то препарат спор, приготовленный в капле воды (фото справа) показывает нам в данном случае липидные (жировые) капли внутри споры. Растровый электронный микроскоп предназначен для исследования с высокой разрешающей способностью поверхности объекта. Псевдоплектания черноватая (Pseudoplectania nigrella)
Слева - стереофотография, справа - одиночная фотография для тех, кто до сих пор не научился рассматривать стереофото
Всегда задавался вопросом, что за "глазки" видны на микрофотографии сухих спор Псевдоплектании? Они, кстати, исчезают при размачивании спор. Е.Попов (на форуме - eugene) помог разрешить эту загадку: – "На самом деле "глазки" - это газовые пузырьки, которые образуются при обезвоживании цитоплазмы спор (так называемые пузырьки Де Бари). При попадании спор в воду они естественным образом исчезают. А на электронных снимках видны спавшиеся (как сдувшийся мяч) из-за вакуума в котором они находятся споры." 
На самом деле газовые пузыри в вакууме должны были бы разорвать спору на части, хотя, более вероятно, что газ просто диффундировал через оболочку споры. Дело в том, что встречались два типа спор - с "глазками" - пузырьками де Бари, и со сдувшимися стенками. Электронно-микроскопическое изображение отчётливо передаёт особенности строения поверхности объектов второго типа (фото справа).
|
|||
|
|
